不知道如何計算菲羅門(mén)色譜柱的死體積？學(xué)會(huì )這個(gè)公式你就明白了
更新更新時(shí)間：2021-04-23
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菲羅門(mén)色譜柱死體積狹義上指的是色譜柱中未被固定相占據的空隙體積，即色譜柱內流動(dòng)相的體積。廣義上的死體積是指進(jìn)樣位置（進(jìn)樣口）到檢測位置（檢測器流通池）這一段的體積（PS:除去色譜柱中填料體積），一旦色譜柱連接，這段體積（圖示橙色管路）是不變的（死的）。
HPLC中菲羅門(mén)色譜柱死體積該如何計算：
死體積(deadvolume,V0)——由進(jìn)樣器進(jìn)樣口到檢測器流動(dòng)池未被固定相所占據的空間。它包括4部分：進(jìn)樣器至色譜柱管路體積、柱內固定相顆粒間隙（被流動(dòng)相占據，Vm）、柱出口管路體積、檢測器流動(dòng)池體積。其中只有Vm參與色譜平衡過(guò)程，其它3部分只起峰擴展作用。為防止峰擴展，這3部分體積應盡量減小。
死時(shí)間(deadtime,t0)——不保留組分的保留時(shí)間。即流動(dòng)相（溶劑）通過(guò)色譜柱的時(shí)間。
測量系統死體積通常需要通過(guò)實(shí)驗進(jìn)行測量，常用方法是通過(guò)進(jìn)一針和色譜柱固定相沒(méi)有任何作用的特殊溶液（方法中會(huì )有規定，例如：尿嘧啶，少量NaNO3或甲醇溶于流動(dòng)相得到的溶液，也有直接用100％色譜純甲醇進(jìn)樣的情形）時(shí)，就會(huì )得到一個(gè)色譜峰，由此峰可以測得死時(shí)間（t0），這就是t0的實(shí)測結果。
然后通過(guò)計算得到系統死體積:
死體積（V0)=死時(shí)間t0×流動(dòng)相的流速F。
